凝胶过滤柱层析测定什么

2026-06-08

凝胶层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,因此就要花费较长的时间流经柱床,从而使不同大小的分子得以分离...

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1简述凝胶色谱技术及其分类 特点

2026-06-01

凝胶色谱技术也叫凝胶层析技术,因为层析的检测仪器是色谱仪,所以叫凝胶色谱。它是通过各种凝胶分离、纯化蛋白质、核苷酸或者病毒等物质的方法。 主要有亲和层析,离子交换层析,分子筛,疏水层析等。 亲和层析利用凝胶上特异性结合的配体分离纯化目的分子;离子交换层析利用目的分子与杂质分子的电荷性质不同进行分离纯化;分子筛利用分子大小不一样进行分离目的分子;疏水层析则利用目的分子与杂质分子的疏水性不同进行分离。 一种高***的样品需要两种以上的层析方式才能得到...

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凝胶柱层析操作方法

2026-05-30

凝胶柱层析的使用方法大体有一下步骤: (1)预处理称取葡聚糖凝胶(有不同型号)若干克,加入洗脱剂(通常为甲醇或者水,这里以甲醇为例)约20倍凝胶量,置室温下3h进行溶胀,溶胀必须彻底,否则会使上柱后流速变慢,凝胶断裂等。 (2)装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15 (3)加样装好的色谱柱至少要用相当于3倍保留体积的洗脱剂平衡。 (4)洗脱与收集洗脱时,用甲醇作洗脱剂,并且要连续不断地进行,使凝胶柱上端保持一定的液层,防止凝胶柱表面的液体流干...

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